Trasformazione di E. coli con Green Fluorescent Protein (GFP)
In questo esperimento, gli studenti esploreranno il processo biologico di trasformazione batterica utilizzando E. coli e DNA plasmidico. Al termine dell’attività, gli studenti avranno esperienza nell’osservare e analizzare i tratti acquisiti (resistenza all’ampicillina e fluorescenza) così come esibiti dalle cellule batteriche trasformate.
• Esplora l’ingegneria genetica e il dogma centrale con questo elegante esperimento
• Trasforma E.coli con pFluoroGreen™ – un plasmide contenente geni per la resistenza all’ampicillina e la proteina fluorescente verde
• Seleziona per le cellule trasformate utilizzando piastre LB-ampicillina e calcola l’efficienza di trasformazione
• Esponi trasformato cellule a IPTG per dimostrare l’espressione genica differenziale
• Il nuovo protocollo di trasformazione ha un’elevata efficienza di trasformazione = ottimi risultati!
Dimensione del gruppo: Per 10 gruppi di laboratorio
Tempo richiesto: Predisposizione – 50 minuti / Incubazione – notte / Trasformazione – 15 minuti
Il kit include: Istruzioni, BactoBeads™ E. coli GFP Host, DNA plasmidico pFluoroGreen™ superavvolto, ampicillina, IPTG, CaCl 2 , additivo per la crescita, ReadyPour™ Luria Broth Agar (sterile), Luria Broth Medium for Recovery (sterile), piastre Petri (piccole), piastre di Petri (grandi), pipette di trasferimento con micropunta in plastica, pipetta da 10 ml avvolta (sterile), stuzzicadenti (sterili), anse di inoculazione (sterili), provette per microcentrifuga
Tutto ciò di cui hai bisogno: Micropipetta automatica (5-50 µl) e puntali, due bagni d’acqua (37ºC e 42ºC), termometro, forno di incubazione (37ºC), pompe o bulbi per pipette, ghiaccio, pennarelli, becco Bunsen, piastra riscaldante o microonde, guanti caldi, lunghi luce UV ondulata
Magazzinaggio: Alcuni componenti richiedono la conservazione in frigorifero e congelatore
V223-AP08
OL-0120
TC10-025
MT15843